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STANDARD 資源中心 RESOURCE CENTER
生物樣品中氨基酸含量檢測(cè)

一、實(shí)驗(yàn)原理

   斯坦德集團(tuán)參照國(guó)標(biāo)GB/T 5009.124-2003食品中氨基酸的測(cè)定，試樣蛋白質(zhì)經(jīng)鹽酸水解成為游離氨基酸，經(jīng)氨基酸自動(dòng)分析儀的離子交換柱分離后，與茚三酮溶液產(chǎn)生顏色反應(yīng)，再通過分光光度計(jì)比色測(cè)定氨基酸含量。

二、儀器和試劑

   L-8900氨基酸自動(dòng)分析儀，DHG-9203J型恒溫干燥箱，DZF-6050型真空干燥器，真空泵；高純氮?dú)猓兌葹?9.99%）。

三、試驗(yàn)方法

1、稱樣

   樣品經(jīng)粉碎后，用電子天平準(zhǔn)確稱量樣品，精確到0.0001g（使樣品蛋白質(zhì)含量10mg~20mg范圍內(nèi)），將稱好的樣品放于水解管中。

2、水解

   在水解管中加入6mol/L鹽酸15mL，加入新蒸餾的苯酚3~4滴，再將水解管放入冰水中，冰凍3~5min，再接到真空泵的抽氣管上，抽完真空后沖入高純氮?dú)猓辉俪檎婵粘涞獨(dú)?，重?fù)三次后，在充滿氮?dú)獾臓顟B(tài)下封口。將已封口的水解管放在110℃±1℃的恒溫干燥箱內(nèi)，水解22h后，取出，冷卻。

   打開水解管，將水解液過濾后，用去離子水多次沖洗水解管，將水解液全部轉(zhuǎn)移到50mL容量瓶?jī)?nèi)，用去離子水定容，吸取濾液1mL于5mL容量瓶?jī)?nèi)，用真空干燥器在40℃~50℃干燥，殘留物用1~2mL水溶解，再干燥，反復(fù)進(jìn)行兩次，最后蒸干，用1mLpH2.2的緩沖液溶解，供儀器測(cè)定用。

四、結(jié)果計(jì)算與評(píng)價(jià)

   斯坦德集團(tuán)利用外標(biāo)法計(jì)算各種氨基酸含量。


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