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泛素化修飾蛋白組學(xué)
泛素化修飾是一種重要的翻譯后修飾,泛素蛋白酶體系統(tǒng)介導(dǎo)了真核生物 80%~85% 的蛋白質(zhì)降解。除此之外,泛素化修飾還可以影響蛋白質(zhì)的定位與活性,參與細(xì)胞周期、轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)、細(xì)胞增殖、分化、信號(hào)傳遞、細(xì)胞凋亡、損傷修復(fù)、炎癥免疫等幾乎一切生命活動(dòng)的調(diào)控。泛素化修飾蛋白組學(xué)利用對(duì)泛素化賴氨酸(K-GG)具有高親和力的基序抗體,特異性富集復(fù)雜樣本中的泛素化肽段,結(jié)合LC-MS/MS高分辨質(zhì)譜蛋白質(zhì)定量方法,實(shí)現(xiàn)大規(guī)模泛素化蛋白質(zhì)的定性定量分析。
糖基化修飾蛋白質(zhì)組學(xué)
糖基化修飾是一種常見的蛋白翻譯后修飾,糖基化在生物體內(nèi)起著重要的作用。糖基化修飾不僅影響著蛋白質(zhì)的空間構(gòu)象、生物活性,在分子識(shí)別、信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)等生物過(guò)程中也發(fā)揮著重要的作用。糖蛋白根據(jù)其糖鏈結(jié)構(gòu)及糖基化位點(diǎn)主要有 N- 糖蛋白與 O- 糖蛋白兩大類。N-糖基化(N-linked glycosylation)是糖鏈通過(guò)與蛋白質(zhì)的天冬酰胺的自由NH2基共價(jià)連接形成的,O-糖基化(O-linked glycosylation)是糖鏈與蛋白質(zhì)的絲氨酸或蘇氨酸的自由OH基共價(jià)連接, O-糖基化位點(diǎn)沒有保守序列,糖鏈也沒有固定的核心結(jié)構(gòu),組成既可是一個(gè)單糖,也可以是巨大的磺酸化多糖,因此與N-糖基化相比,O-糖基化分析會(huì)更加復(fù)雜。目前常用的糖蛋白分離富集技術(shù)有以下五種:凝集素親和技術(shù)、肼化學(xué)富集法、硼酸法、免疫法, 親水相互作用色譜法(HILIC)。
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